克罗诺杆菌检验

  克罗诺杆菌，原名阪崎肠杆菌，是一种食源性致病菌。它广泛存在于自然环境中，如土壤、水、植物根茎等，但最受关注的是它能引起婴儿，特别是新生儿和2个月以下婴儿的严重甚至致命的感染。

 其主要危害为引起婴儿败血症、坏死性小肠结肠炎和脑膜炎。其中，脑膜炎可能导致严重的神经系统后遗症（如脑脓肿、脑室炎、发育障碍等），死亡率高达40%-80%。婴儿配方奶粉是其最受关注的传播途径。克罗诺杆菌在干燥环境下生存能力强，可在奶粉生产环节中（如原料、加工环境）存在，并污染终产品。

  现根据GB4789.40-2024克罗诺杆菌检验，详细描述一下其定性检验过程

图一：克罗诺杆菌检验程序

1、  前増菌和选择性増菌

取100g（mL）样品置于无菌容器内，加入已经预热至41℃±1℃的900mL BPW中，缓慢摇动至充分溶解，36℃±1℃培养18h±2h。轻轻晃动混匀培养液，取1mL至10mL mLST-Vm肉汤中，41.5℃±1℃培养24h±2h。

图二：mLST-Vm肉汤培养基41.5℃±1℃培养24h±2h后。

2、 分离培养

轻轻混匀mLST-Vm肉汤培养物，使用10ul接种环各取1环増菌培养物，分别划线接种于2个克罗诺杆菌显色培养基平板36℃±1℃培养24h±2h，挑取克罗诺杆菌上生长的蓝绿色可疑菌落，每个平板挑取至少5个可疑菌落（不足5个时挑取全部可疑菌落），分别划线于TSA平板36℃±1℃培养24h±2h。

图三：克罗诺杆菌在克罗诺杆菌显色培养基上的特征性反应

3、 PCR鉴定（选做）

4、  确证试验

未选做PCR时，将接种于TSA的可疑菌落进行生化鉴定，主要特征见下表

图四：克罗诺杆菌主要生化特征

图五：克罗诺杆菌生化特征

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